大肠菌群、大肠杆菌检测时,所用培养基LST、BGLB、EC肉汤等这些需要用小倒管(杜氏管)考察产气的培养基,灭菌后,偶尔会有小气泡留在小倒管内,导致培养基不能使用。重复灭菌不仅费时,更重要的是会破坏培养基的有效成分。为了避免这类问题的发生,我公司实验室根据实验经验,做出以下几种可能原因分析:
原因一:高温高压灭菌锅工作压力不够,使气体不能完全排出
高压锅在灭菌过程中产生的最大压力不够,不能将小倒管内的气体挤出,导致灭菌后任留有小气泡。此外,高温高压灭菌锅若是温度上升缓慢或者达不到灭菌温度,也会出现类似现象。
解决办法:使用检查灭菌效果的用品-压力蒸汽灭菌指示卡,对高温高压灭菌锅的灭菌情况进行监测。
原因二:试管塞塞得太紧
在灭菌时,试管塞塞得太紧(有些硅胶塞与试管不配套)会导致试管内压力与灭菌锅内压力不一致。当灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于试管内压力,试管内压力不够,不能将小倒管内气体排尽,就留有气泡;当灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。
解决办法:改用塑料帽、不锈钢管帽,或者与试管相匹配的硅胶塞。
原因三:小倒管口太小
小倒管在加热加压后,一方面液体培养基要进入小倒管,另一方面小倒管内部的空气要被排出,如果小倒管管口太小,液体不容易进去,里面的空气不容易被排出,就会导致有小气泡生成。
解决办法:改用开口比较大的倒管。